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對于離心機(jī)的分離效果,我們常常會考慮離心機(jī)種類,離心方法,離心介質(zhì)等因素,但是在實(shí)際操作中,除了以上幾點(diǎn),離心機(jī)轉(zhuǎn)速和離心時間以及離心介質(zhì)的PH值和溫度等條件也是很重要的,下面就為大家詳細(xì)介紹一下后面三種因素對于分離效果的影響。
1、離心時間
實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的離心時間是影響離心效果十分重要的一個因素,離心方法的不同所需要的離心時間也會不同。下面以差速離心和等密度梯度離心以及密度梯度離心為例,詳細(xì)介紹。對于差速離心來說,離心時間指的是某種顆粒完全沉降到離心管底的時間;而對于等密度梯度離心來說,離心時間則是指顆粒完全到達(dá)等密度點(diǎn)的平衡時間;最后一個密度梯度離心的離心時間指的是形成界限分明的區(qū)帶的時間。對于后面兩種離心方法,其所需的區(qū)帶形成時間或平衡時間,影響因素很復(fù)雜,可通過試驗(yàn)后確定。
2、離心轉(zhuǎn)速
離心機(jī)的轉(zhuǎn)速的大小主要由轉(zhuǎn)子的轉(zhuǎn)速和顆粒的旋轉(zhuǎn)半徑來決定,在說明離心條件時,往往也用相對離心力場來表示。實(shí)際工作中,離心力場的數(shù)據(jù)是指其平均值。即是指在離心溶液中點(diǎn)處顆粒所受的離心力場。
3、離心介質(zhì)的PH值和溫度
離心介質(zhì)的PH值的設(shè)定一般是處于酶穩(wěn)定的PH范圍內(nèi),可采用緩沖液,在試驗(yàn)過稱重,要避免過酸或者過堿的環(huán)境對離心機(jī)本身產(chǎn)生腐蝕作用?! ≡趯?shí)驗(yàn)室離心機(jī)工作時,除了要格外注意對離心介質(zhì)的選擇之外,還要控制好溫度及介質(zhì)溶液的PH值等離心條件,防止其分離物質(zhì)的凝集、變性和失活。一般來說,我們將離心溫度會控制在4℃左右,對于某些熱穩(wěn)定性較好的酶等,離心也可在室溫下進(jìn)行。
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