全國(guó)服務(wù)熱線:400-0731-237
電話:0731-88139741 88139742
傳真:0731-88137983
地址:湖南省長(zhǎng)沙市高新技術(shù)開發(fā)區(qū)匯智中路169號(hào)金榮·同心國(guó)際工業(yè)園A區(qū)7棟
E-mail:
sales@xiangzhilxj.com
售后服務(wù)電話:
周工:136 7748 4590
在現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)研究中,常常需要將全血中單核白細(xì)胞(淋巴細(xì)胞、大單核細(xì)胞)與紅細(xì)胞和多形核白細(xì)胞分離。在臨床治療應(yīng)用中常常需要將全血作成分分離(全血分離成血漿,血小板,白細(xì)胞,紅細(xì)胞等等)
(一)血細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)室純化:
血液中存在著各種不同類型的血細(xì)胞,每種類型細(xì)胞有不同的特點(diǎn)和功能。醫(yī)學(xué)研究常常需要較純的單一品種的血細(xì)胞。用離心法分離和純化是非常有效的手段,但如何使血細(xì)胞的密度梯度分離簡(jiǎn)單而且實(shí)用,很多科學(xué)家和試劑生產(chǎn)廠作了大量的研究和篩選。在這方面Bφyum(文獻(xiàn)1)做了開拓性的研究,他使用挪威Nycomed pharma,A/S公司生產(chǎn)的梯度材料Lymphoprep 和由瑞典Pharmacia-Biosystems AB 公司提供的Ficoll Paque,用簡(jiǎn)單的低速階梯梯度離心純化了單核白細(xì)胞獲得成功。此后(文獻(xiàn)2),用非電離性梯度材料Na-metrigoate 和Nycodenz(可消除多糖成分)純化血細(xì)胞效果更好。
典型的離心分離實(shí)驗(yàn):
1. 人血單核細(xì)胞的純化:
Ⅰ 加有抗凝劑的全血樣品,通常加0.32%檸檬酸鈉較為普遍;
Ⅱ 用等量的等滲鹽液稀釋全血
Ⅲ 在10-15ml離心管下部注入3ml Na-metrizoate-Ficoll分離液
Ⅳ 在分離液上部小心地鋪蓋6ml已經(jīng)稀釋的全血
Ⅴ 低速離心機(jī),水平轉(zhuǎn)頭,單管容量10-15ml,600xg,20分鐘,20℃,慢加速,慢減速。(不要用4-5℃,否則效果很差)
Ⅵ 離心后,單核細(xì)胞和少量血小板懸浮在血液樣品和分離液的中向夾層,小心地用吸管吸出
Ⅶ 在單核細(xì)胞中加幾毫升生理鹽水以降低其密度
Ⅷ 用同樣的離心機(jī)250xg,5分鐘,20℃?#27927;?#25968;次,可以得到更純的單核細(xì)胞沉淀
Ⅸ 制備的細(xì)胞可重懸浮在生理鹽水或同源血漿中待用
2. 單核血細(xì)胞和多形核血細(xì)胞的單次離心分離法:
Ⅰ 剛抽出的新鮮人血,加抗凝劑后,取3-5ml鋪在10ml離心管底部
Ⅱ 血樣上部鋪等量的Polymorphoprep(Nycomed Pharma A/S公司產(chǎn)品)
(注意:選擇較細(xì)長(zhǎng)透明塑料(PC或PET)離心管或玻璃離心管,液柱總高在6-10mm左右)
Ⅲ 離心:低速或高速冷凍離心機(jī)水平轉(zhuǎn)頭450g?5分鐘,20℃
Ⅳ 離心后細(xì)胞分布:以10cm液柱為例,底部1.2-1.4cm為紅細(xì)胞,往上3cm為分離液,再往上0.4cm為中性白細(xì)胞帶(多形核白細(xì)胞),再往上0.6-0.8cm為分離液,在這層分離液和最上層血漿之間夾有一層約0.4cm液柱高的單核細(xì)胞
Ⅴ 如果離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng),或溫度過(guò)高,多形核白細(xì)胞(主要是中性白細(xì)胞)也會(huì)變成沉淀
------ 責(zé)任編輯:
聯(lián)系電話:
湘智離心機(jī)版權(quán)所有,轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處
產(chǎn)品名稱:TD5B醫(yī)用離心機(jī)
產(chǎn)品特點(diǎn):微機(jī)控制、無(wú)刷電機(jī)、噪聲小,專為美容...[詳情>>]
產(chǎn)品名稱:TGL-16MB高速冷凍離
產(chǎn)品特點(diǎn):具有RCF自動(dòng)計(jì)算,設(shè)有不平衡,超速、超...[詳情>>]
產(chǎn)品名稱:DL-6MB-低速冷凍大容
產(chǎn)品特點(diǎn):低速冷凍大容量離心機(jī)是微機(jī)控制,變頻...[詳情>>]
產(chǎn)品名稱:TD6B臺(tái)式低速離心機(jī)
產(chǎn)品特點(diǎn):該機(jī)適用于生物化學(xué)、放射免疫實(shí)驗(yàn)室...[詳情>>]
產(chǎn)品名稱:TDZ4-WS低速自動(dòng)平衡
產(chǎn)品特點(diǎn):微機(jī)控制、數(shù)字顯示、全觸摸面板、無(wú)...[詳情>>]
產(chǎn)品名稱:XZ-25K高速冷凍離心
產(chǎn)品特點(diǎn):XZ-25K高速冷凍離心機(jī)廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)...[詳情>>]
產(chǎn)品名稱:DLM12L超大容量實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品特點(diǎn):采用國(guó)際最先進(jìn)的數(shù)字控制電路,使離心...[詳情>>]
產(chǎn)品名稱:XZ-16T臺(tái)式高速離心
產(chǎn)品特點(diǎn):微機(jī)控制,數(shù)字顯示,無(wú)刷電機(jī),觸摸面板...[詳情>>]
產(chǎn)品名稱:XZ-P6脫帽實(shí)驗(yàn)室離心
產(chǎn)品特點(diǎn):微機(jī)控制,交流變頻電機(jī),高精度,低噪音...[詳情>>]
產(chǎn)品咨詢
滿足個(gè)性化需求可定制產(chǎn)品
發(fā)貨快,服務(wù)周到
全天24小時(shí)售后響應(yīng)
地址:湖南省長(zhǎng)沙市高新技術(shù)開發(fā)區(qū)匯智中路169號(hào)金榮·同心國(guó)際工業(yè)園A7棟6樓 全國(guó)服務(wù)熱線:400-0731-237
版權(quán)所有:長(zhǎng)沙湘智離心機(jī)儀器有限公司,未經(jīng)書面授權(quán),所有頁(yè)面內(nèi)容不得以任何形式進(jìn)行復(fù)制粘貼,一經(jīng)發(fā)現(xiàn)將追究法律責(zé)任,后果自負(fù)!
湘公網(wǎng)安備43019002000533湘ICP備16002798號(hào) Copyright 2004-2019